色谱柱:装有固定相的管子,一般是玻璃管或者是不锈钢管。
固定相:填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的固体或液体。
流动相:通过色谱柱流动的气体或液体。
当流动相中样品混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用,由于各组分在性质和结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强弱也有差异,因此在同一推动力的作用下,不同分组在固定相滞留时间长短不同,从而按先后不同的次序从固定相中流出。
1.按流动相和固定相的物理状态分类
按流动相分为气相色谱法和液相色谱法。固定相可以是固体或者涂渍在固体载体表面上的液体。气相色谱又可分为气-固色谱法和气-液色谱法,气液色谱的固定相是附着在惰性载体上的一层薄薄有机化合物液体。液相色谱法又分为液-固色谱法和液-液色谱法。
2.按分离机理分类(固定相与组分之间的作用力)
利用组分在固定相上的吸附能力强弱不同而分离的方法,称为吸附色谱法。利用组分在液态固定相中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法,利用组分在离子交换剂固定相上的亲和力大小不同而达到分离的方法,称为离子交换色谱法。利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法,称为凝胶色谱法或空间排阻色谱法。
1.分离效率高,柱效可达数十万理论塔板数。
2.分析速度快,几分钟到几十分钟就可以进行一次复杂样品的分离和分析。
3.灵敏度高,可测定10-12g微量组分。
4.样品用量少,用毫克、微克级样品即可完成一次分离和测定。