质谱法检测水中丙烯酰胺的步骤

 质谱法检测水中丙烯酰胺的原理是将水样经0.22um滤膜过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用多反应监测（MRM）模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，内标法定量分析。该方法检出限为0.036ug/L，测定下限为0.15ug/L。

检测试剂

1.一次性针头过滤器：0.22um，聚四氟乙烯（PTFE）材质。

2.一次性注射器：2.5mL。

3.高纯水：水质应满足GB/T33087的规定。

4.甲醇：色谱纯。

5.载气：高纯氮，纯度≥99.999%。

6.丙烯酰胺标准溶液：1000mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。

7.丙烯酰胺同位素（D3-丙烯酰胺）标准溶液：1000mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。

8.丙烯酰胺标准贮备液：10.0mg/L。

取1.00mL丙烯酰胺标准溶液，用甲醇稀释并定容至100mL，配制10.0mg/L丙烯酰胺标准贮备液。于4℃以下冷藏密封避光保存。

9.D3-丙烯酰胺标准贮备液：10.0mg/L。

取1.00mLD3-丙烯酰胺标准溶液，用甲醇稀释并定容至100mL，配制10.0mg/LD3-丙烯酰胺标准贮备液。于4℃以下冷藏密封避光保存。

10.丙烯酰胺标准使用液：10.0ug/L。

取100uL丙烯酰胺标准贮备液，用高纯水稀释并定容至100mL，配制10.0ug/L丙烯酰胺标准使用液。

11.D3-丙烯酰胺标准使用液：10.0ug/L。

取100uLD3-丙烯酰胺标准贮备液，用高纯水稀释并定容至100mL，配制10.0ug/LD3-丙烯酰胺标准使用液。

检测所需仪器

1.液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。

2.色谱柱：C18色谱柱或其他性能等效的色谱柱。

3.样品瓶：2mL。

4.容量瓶：100mL和10mL。

5.采样瓶：棕色玻璃瓶，具玻璃塞。

6.微量注射器：1000uL。

水样采集保存方法

  水样采集后在4 ℃以下冷藏保存，24 h内完成水样过滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。

水样制备

   水样经一次性针头过滤器过滤，取水样于10mL容量瓶中，加入400uLD3-丙烯酰胺标准使用液，用水样定容至刻度。置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂，可将水样适当稀释后，再经过一次性针头过滤器过滤。

用实验室一级纯水代替样品，按照与试样制备相同的步骤制备空白试样。

检测步骤

色谱分析条件

1. 流动相：A相——甲醇，B相——水，A:B=10:90（V:V），等度洗脱。

2. 流速：0.3 mL/min。

3. 柱温：30 ℃。

4. 进样体积：10uL。

质谱分析条件

1. 离子源：电喷雾离子源，正离子模式。

2. 离子源温度：350 ℃。

3. 扫描方式：MRM，多反应监测条件参照下图

校准曲线的绘制

1. 本方法使用内标法定量。

2. 校准系列的配制：取5个10 mL容量瓶，用微量注射器依次准确加入200uL、500uL、1 000uL、1 500uL和2 000uL丙烯酰胺标准使用液及400uL D3-丙烯酰胺标准使用液，用高纯水定容至刻度，配制浓度为0.20ug/L、0.50ug/L、1.00ug/L、1.50ug/L和2.00ug/L的校准曲线系列。现用现配。

3. 按照质量浓度从低到高依次进样，以标准系列溶液中目标组分的浓度与内标物浓度的比值为横坐标，以其对应的峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，建立校准曲线。

水样检测

1. 采用自动进样器进样，进样量为10uL。

2. 按照与校准曲线的绘制相同的步骤进行试样的测定。

3. 丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色谱图见相关图表所示。

 

定性结果

  根据丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。

定量结果

  根据计算公式计算样品中组分的含量，结果以微克每升（ug/L）表示。丙烯酰胺的定量离子对为72.1＞55.1，D3-丙烯酰胺的定量离子对为75＞58。测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。

以上内容来源于《DB37/T 4145—2020 水质 丙烯酰胺的测定 液相色谱-串联质谱法》

  水质检测